MS DNA WP.pdf

(713 KB) Pobierz
2011-03-10
Genetyka układu głównego ABO krwi człowieka
układ ABO odkryty przez Karla Landsteinera 1900
Badania hemogenetyczne
w medycynie sądowej
Cztery fenotypy determinowane przez trzy warianty genu
(allele): I A , I B , i.
Gen koduje enzym – glikozylotransferaze, na powierzchni
czerwonych krwinek syntezowane są antygeny grupowe: A, B
albo ich brak :O
Marek Sanak
Różnica między A i B polega na przyłęczeniu przez enzym -N-
Różnica między A i B polega na przyłęczeniu przez enzym N
galaktozaminy albo galaktozy
Collegium Medicum UJ
antygen = cząsteczka, która może być rozpoznana przez układ
odporności i spowodować produkcje przeciwciał
przeciwciało = immunoglobulina rozpoznająca swoiście
antygen
1930: Karl Landsteiner (Rockefeller Institute)
Przeciwciała układów grupowych
krwi
1.
Naturalnie obecne:
- ABO
- Anti-Hi, P1, E
Powstające w wyniku uodpornienia
2.
W ciąży:
- Rhesus, Kell, Fy a + Others
3.
Po przetoczeniach:
- Rh, Kell, Fy, JK a + Others
1
778423573.184.png 778423573.195.png 778423573.206.png 778423573.217.png 778423573.001.png
2011-03-10
Oznaczanie (typowanie) grup
krwi
Przykład innych grup krwi
wskazane zamiany
aminokwasowe białka
krwinek czerwoncyh
Wi t M 1 (S
Wariant M –seryna1 (Ser-
1) i glicyna 5 (Gly-5)
Wariant N – leucyna 1 (Leu-
1) i glutamina 5 (Glu-5)
krwinki pacjenta vs
testowe przeciwciała
surowica pacjenta vs
testowe krwinki
schemat interpretacji wyników: + oznacza
zlepianie krwinek
krwinki pacjentów
PT 1
PT 2
PT 3
PT 4
Anti A
+
-
+
-
Anti B
-
+
+
-
Anti AB
+
+
+
-
A
B
AB
O
2
778423573.012.png 778423573.023.png 778423573.034.png 778423573.045.png 778423573.056.png 778423573.067.png 778423573.078.png 778423573.089.png 778423573.100.png 778423573.111.png
2011-03-10
nowoczesna metoda typowania
grupa krwi
Grupa?
p
RhD ?
Częstość głównych grup krwi w
Europie
•Grupa O
Trudny początek badań DNA w
medycynie sądowej
56%
•Grupa A
31%
•Grupa B
11%
•Grupa AB
2.5%
•Rh (D) dodatni
85%
Orenthal James Simpson
•Rh (D) ujemny
15%
lata 1986 - 1994 - dyskusja dotycząca
wartości dowodowej DNA w kontekście
genetyki populacyjnej: Bruce Budowle vs. Eric
Lander
przy zastosowaniu 8 układów grupowych krwi – w
94% dochodzeń spornego ojcostwa nie można
wykluczyć pozwanego
3
778423573.122.png 778423573.133.png 778423573.144.png 778423573.148.png 778423573.149.png
2011-03-10
sekwencja DNA jest
dziedziczna
Budowa kwasu
deoksyrybonukleonowego (DNA)
Układ grupowy Rh
AB0
można
badać
sekwen-
sekwen
cjonując
gen
4
778423573.150.png 778423573.151.png 778423573.152.png 778423573.153.png 778423573.154.png 778423573.155.png 778423573.156.png 778423573.157.png 778423573.158.png 778423573.159.png 778423573.160.png 778423573.161.png 778423573.162.png 778423573.163.png 778423573.164.png 778423573.165.png 778423573.166.png 778423573.167.png 778423573.168.png 778423573.169.png 778423573.170.png 778423573.171.png 778423573.172.png 778423573.173.png 778423573.174.png 778423573.175.png 778423573.176.png 778423573.177.png 778423573.178.png 778423573.179.png 778423573.180.png 778423573.181.png 778423573.182.png 778423573.183.png 778423573.185.png 778423573.186.png 778423573.187.png 778423573.188.png 778423573.189.png 778423573.190.png 778423573.191.png 778423573.192.png 778423573.193.png 778423573.194.png 778423573.196.png 778423573.197.png 778423573.198.png 778423573.199.png 778423573.200.png 778423573.201.png 778423573.202.png 778423573.203.png 778423573.204.png 778423573.205.png 778423573.207.png 778423573.208.png 778423573.209.png 778423573.210.png 778423573.211.png 778423573.212.png 778423573.213.png 778423573.214.png 778423573.215.png 778423573.216.png 778423573.218.png 778423573.219.png 778423573.220.png 778423573.221.png 778423573.222.png 778423573.223.png 778423573.224.png 778423573.225.png 778423573.226.png 778423573.227.png 778423573.002.png 778423573.003.png 778423573.004.png 778423573.005.png 778423573.006.png 778423573.007.png 778423573.008.png 778423573.009.png 778423573.010.png 778423573.011.png 778423573.013.png 778423573.014.png 778423573.015.png 778423573.016.png 778423573.017.png 778423573.018.png 778423573.019.png 778423573.020.png 778423573.021.png 778423573.022.png 778423573.024.png 778423573.025.png 778423573.026.png 778423573.027.png 778423573.028.png 778423573.029.png 778423573.030.png 778423573.031.png 778423573.032.png 778423573.033.png 778423573.035.png 778423573.036.png 778423573.037.png 778423573.038.png 778423573.039.png 778423573.040.png 778423573.041.png 778423573.042.png 778423573.043.png 778423573.044.png 778423573.046.png 778423573.047.png 778423573.048.png 778423573.049.png 778423573.050.png 778423573.051.png 778423573.052.png 778423573.053.png 778423573.054.png 778423573.055.png 778423573.057.png 778423573.058.png 778423573.059.png 778423573.060.png 778423573.061.png 778423573.062.png 778423573.063.png 778423573.064.png 778423573.065.png 778423573.066.png 778423573.068.png 778423573.069.png 778423573.070.png 778423573.071.png 778423573.072.png 778423573.073.png 778423573.074.png 778423573.075.png 778423573.076.png 778423573.077.png 778423573.079.png 778423573.080.png 778423573.081.png 778423573.082.png 778423573.083.png 778423573.084.png 778423573.085.png 778423573.086.png 778423573.087.png 778423573.088.png 778423573.090.png 778423573.091.png 778423573.092.png 778423573.093.png 778423573.094.png 778423573.095.png 778423573.096.png 778423573.097.png 778423573.098.png 778423573.099.png 778423573.101.png 778423573.102.png 778423573.103.png 778423573.104.png 778423573.105.png 778423573.106.png 778423573.107.png 778423573.108.png 778423573.109.png 778423573.110.png 778423573.112.png 778423573.113.png 778423573.114.png 778423573.115.png 778423573.116.png 778423573.117.png 778423573.118.png 778423573.119.png 778423573.120.png 778423573.121.png 778423573.123.png 778423573.124.png 778423573.125.png 778423573.126.png 778423573.127.png 778423573.128.png 778423573.129.png 778423573.130.png 778423573.131.png
2011-03-10
polimorfizm długości fragmentów
restrykcyjnych (RFLP)
Badanie profilu DNA
ślad
biologiczny
ślad
biologiczny
krew
ojciec dziecko matka
krew
krew
izolacja DNA
cięcie enzymem
lk f
elektroforeza
sonda jednolokusowa – fragmenty
sonda jednolokusowa fragmenty
restrykcyjne pochodzą z
pojedynczego miejsca w genomie
sonda wielolokusowa – fragmenty
restrykcyjne pochodzą z różnych
chromosomów
transfer na
membranę
hybrydyzacja z
sondą
detekcja sondy
sygnatura
wielolokusowa
sygnatura
jednolokusowa
ślad
biologiczny
ślad
biologiczny
krew
krew
ojciec dziecko matka
wykorzystanie RFLP w medycynie
sądowej
Ilość DNA w śladach biologicznych
identyfikacja –
sonda
wielolokusowa
dochodzenie ojcostwa
50 l krwi (plama)
5-10 g
sondy
jednolokusowe
50 l nasienia
7-15 g
podejrzani
wymaz z pochwy
0,1
01 – 3 ng
wymaz z pochwy
3 ng
sonda 1
M D P
sonda 1
M D P
cebulka włosa
30 ng
trzon włosa
0,1 ng
do badania metodą RFLP 10 – 20 g / 1 układ
do badania metodą PCR (STR) 1-3 ng / 3-10 układów
5
778423573.132.png 778423573.134.png 778423573.135.png 778423573.136.png 778423573.137.png 778423573.138.png 778423573.139.png 778423573.140.png 778423573.141.png 778423573.142.png 778423573.143.png 778423573.145.png 778423573.146.png 778423573.147.png
Zgłoś jeśli naruszono regulamin