Wyznaczanie krzywej Michaelisa.doc

(166 KB) Pobierz
Wyznaczanie krzywej Michaelisa

Wyznaczanie krzywej Michaelisa                                                                                                                gr I i gr II

Wyznaczanie krzywej Michaelisa

 

Do wyznaczenia krzywej i stałej Michaelisa musimy zbadać wpływ  stężenia substratu na szybkość reakcji. Obserwacji będziemy dokonywac na  reakcji hydrolizy sacharozy, która będzie katalizowania przez inwertazę. (Inwertaza należy do hydrolaz rozszczepiających wiązania glikozydowe)

 

Czynności:

  1. Przygotowujemy probówki; oznaczamy je odpowiednimi indexami z tabel a i b; oraz przygotowujemy w nich roztwory o takim składzie jak w tabelach a i b

 

    1. Probówki dla próby ślepej (S) i dla czasu t=0:

 

 

 

SA

0.2cm3 0.1M sacharozy

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

0.2cm3 buf octanowego

A0

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

0.2cm3 0.1M sacharozy

0,2cm3 enzymu

SB

0.2cm3 0.1M sacharozy

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

0.2cm3 buf octanowego

B0

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.05M NaOH

0.2cm3 0.1M sacharozy

0,2cm3 enzymu

Sc

0.2cm3 0.1M sacharozy

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

0.2cm3 buf octanowego

C0

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.025M NaOH

0.2cm3 0.1M sacharozy

0,2cm3 enzymu

 

 

 

    1. Probówki dla właściwego doświadczenia

 

A

3cm3 0,1M sacharoza

3cm3 enzymu

A5

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

A10

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

A15

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

A30

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

B

3cm3 0,05M sacharoza

3cm3 enzymu

B5

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

B10

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

B15

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

B30

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

C

3cm3 0,025M sacharoza

3cm3 enzymu

C5

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

C10

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

C15

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

C30

3.5cm3 odcz. Nelsona

0.1cm3 0.1M NaOH

 

 

  1. Gotujemy ślepą próbę przez 20 w wrzącej łaźni wodnej. Mierzymy absorbancje dla l=520 nm :

 

SA

0,071

A0

0,002

SB

0,063

B0

0,009

Sc

0,059

C0

0,016

 

 

  1. Probówki A, B, C wstawiamy do łaźni wodnej o temp 37°C i po 5, 10,...

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Inne foldery tego chomika:

Zgłoś jeśli naruszono regulamin